Chef(s) de projet: Patricia Sheen
Problème
Le manque d’observance du traitement DOTS (traitement de courte durée observé directement) est une menace pour les efforts de lutte contre la tuberculose (TB), provoquant l’échec du traitement et l’émergence d’une multi-résistance aux médicaments antituberculeux (MR TB).
La pyrazinamide (PZA) tue la tuberculose latente, mais elle donne lieu à une résistance croissante au Pérou où un tiers des cas de MR TB montrent également une résistance à la PZA. La PZA peut également produire de sérieux effets hépatiques indésirables.
Il est important de déterminer la sensibilité à la PZA à la première étape du traitement afin de proposer un régime sécuritaire et améliorer l’observance du traitement. Cependant les essais de susceptibilité à la PZA sont loin d’être suffisants.
Solution
Ce projet portait sur une étude visant à déterminer la résistance à la pyrazinamide (PZA) dans des échantillons de Mycobacterium tuberculosis prélevés directement sur des crachats, avec une analyse de susceptibilité au médicament par observation microscopique pour la pyrazinamide (MODS-PZA) et le biomarqueur de l’acide pyrazinoïque (MODS-Wayne).
La détection de la susceptibilité à la PZA dans le test MODS-PZA se fait par évaluation au microscope de la croissance de M. tuberculosis. L’absence de croissance indique que la souche est sensible à la PZA.
Le test MODS-Wayne était basé sur des résultats antérieurs de l’équipe, qui avaient montré que le taux d’écoulement de l’acide pyrazinoïque dans M. tuberculosis différencie les souches résistantes à la PZA de souches sensibles à la PZA, les souches sensibles à la PZA pouvant produire et avoir un taux d’écoulement de l’acide pyrazinoïque plus élevé que les souches résistantes à la PZA.
Pour le test MODS-Wayne, la détection de la susceptibilité à la PZA se fait par visualisation d’une couleur brun-rouge après la réaction entre le sulfate de fer II et d’ammonium et l’acide pyrazinoïque.
Les essais ne requièrent pas de matériel et de réactifs coûteux.
Deux concentrations de PZA ont été évaluées : 400 et 800 pg/ml.
Chaque méthode a été comparée à une norme composite obtenue en employant trois méthodes : MGIT 960PZA, Wayne Assay, et mutations pncA. Les méthodes ont été évaluées dans un environnement contrôlé limité de 194 échantillons.
Résultat
Les résultats ont montré que les tests MODS-PZA et MODS-Wayne constituent des méthodes prometteuses pour déterminer la susceptibilité à la PZA à grande échelle et en un temps relativement court (moins de 21 jours), avec une sensibilité (80,95 % et 90,91 %, respectivement) et une spécificité (97,33 % et 98,01 %, respectivement) élevées.
Ces tests ont aussi montré une forte corrélation avec les analyses standards.
Il serait nécessaire de poursuivre les études de validation en utilisant un échantillon plus large.
L’équipe a présenté une demande de financement au Conseil national des sciences et de la technologie (CONCYTEC) et au Programme national d’innovation pour la compétitivité et la productivité (Ministère de la production-INNOVER) du Pérou.