Chef(s) de projet: Claire Mugasa
Problème
La trypanosomiase humaine africaine (THA) est une maladie tropicale très négligée.
Environ 20 à 30 % des patients atteints de THA ne sont toujours pas diagnostiqués par les techniques parasitologiques actuelles.
Dans la dernière décennie, un seul test moléculaire, l’amplification isotherme à médiation en boucle, a montré un potentiel d’utilisation dans les zones éloignées où la maladie est endémique.
Solution
L’’étude visait à développer une analyse à amplification isotherme hélicase dépendante (AHD) pour la détection de l’ADN du trypanosome à l’étape de la démonstration de principe.
L’AHD est un test isotherme qui utilise l’hélicase de l’ADN en présence de protéines de liaison (SSB) pour générer des modèles d’ADN à un seul brin (ADNsb) en dissociant l’ADN double brin (ADNdb) pour l’hybridation d’amorce et l’extension par subséquente, en utilisant la polymérase.
Résultat
L’ADH a été développée en utilisant l’ADN extrait de parasites T. brucei de cultures (souris) in-vitro et in-vivo et en se fondant sur des amorces du gène ribosomique 18S (ADNr 18S) et l’amplicon de 71 paires de bases détectées sur un gel d’agarose à 2,5 %.
La sensibilité analytique du test était de 10 parasites par ml de culture in vitro.
La prochaine étape du projet de recherche est d’achever le développement du prototype de test et de procéder à des essais pour évaluer sa précision.