Chef(s) de projet: Keertan Dheda
Problème
L’infection opportuniste la plus fréquente chez les personnes infectées par le VIH est la tuberculose.
Les personnes sévèrement immunodéprimées ont un risque de mortalité plus élevé que la moyenne des patients atteints de tuberculose et elles ont plus à gagner d’un diagnostic rapide de la tuberculose et d’un traitement immédiat.
Actuellement, la détection rapide de la tuberculose chez ces patients peut se faire au point de traitements en seulement 30 minutes en utilisant le Determine TB-LAM, une « analyse d’urine sur bande » à flux latéral commercialement disponible.
Une étude antérieure a cependant montré que le test LAM avait une spécificité >95 %, mais une sensibilité sous-optimale de ~ 50 %.
Solution
L’équipe du projet a initialement proposé de remédier à ce problème de sensibilité sous-optimale en développant une analyse de flux latéral ultra-sensible pour la détection des aptamères.
Cependant, les difficultés techniques liées à la production d’aptamères LAM ont incité l’équipe à se concentrer plutôt sur l’utilisation d’anticorps des LAM et d’anticorps monoclonaux dirigés contre un biomarqueur pour la tuberculose extrapulmonaire, l’interféron gamma (IFNγ).
Résultat
Bien que l’équipe n’ait pas développé un prototype fonctionnel tel que prévu, elle a réussi à optimiser plusieurs composantes qui, ensemble, formeront éventuellement un prototype de dispositif ultrasensible de détection de la tuberculose chez les patients atteints du VIH.
Réalisations du projet jusqu’à maintenant :
· Élaboration d’anticorps monoclonaux anti-IFNγ;
· Création d’un test ELISA fonctionnel à utiliser comme norme de référence qui a été validé dans des échantillons cliniques;
· création d’anticorps polyclonaux et monoclonaux anti-LAM;
· élaboration d’un test à flux latéral anti-IFNγ fonctionnel;
· création d’aptamères anti-IFNy fonctionnels;
· démonstration de principe d’un circuit électrochimique fonctionnel sur une électrode imprimée en utilisant les anticorps monoclonaux anti-IFNy et anti-LAM.
Le résultat le plus important du projet a été la production d’une immunoanalyse pour la détection de l’IFNy et des LAM et l’amélioration de la détection dans des échantillons cliniques non-tuberculeux contenant des biomarqueurs lorsqu’appliqués à une plateforme électrochimique.
Appliquée à une analyse de flux latéral effectuée sur place, la combinaison augmentera la sensibilité et diminuera la variabilité entre les lectures de l’analyse à flux latéral LAM courante et offrira un tout nouveau test pour dépister la tuberculose au point de traitement.
Le projet a suscité l’attention du MRC et de SHIP, qui ont fourni un financement supplémentaire de 3 210 084 $ pour 2 années supplémentaires.
Le projet a également donné lieu à une forte culture de collaboration, ce qui est essentiel pour faire progresser le dispositif de dépistage au point de traitement vers la fabrication à grande échelle.
Le consortium actuel va puiser dans l’expertise d’Antrum Biotech en exploitant davantage le financement du gouvernement et des ONG une fois que le premier prototype aura été validé.